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菌种活化方法

首先确定所活化的菌株为ATCC菌株还是国产菌株,如果是ATCC菌株则按照其说明书的方法进行,说明书可在陆桥公司网站上下载;如果是国产菌株,可按以下方法进行活化。

1、用浸过75%酒精的脱脂棉擦净菌种管壁。

2、用锉刀或镊子敲下已开裂的菌种管的顶端。

3、用无菌吸管吸取0.3mL-0.4mL适宜的液体培养基,滴入菌种管内,轻轻振荡,使冻干菌体溶解成悬浮状液体。

(1)一般细菌建议使用胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)、脑心浸液肉汤(BHI)等高营养的培养基

(2)嗜盐性弧菌建议使用含3%-3.5%氯化钠的胰蛋白胨大豆肉汤

(3)乳酸菌建议使用MRS肉汤

(4)真菌建议使用真菌培养基

4、用无菌接种环取菌悬液划线接种于适宜培养基的平板或斜面上,剩余的菌悬液倒入液体培养基中。

(1)一般细菌建议使用胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)、平板计数琼脂(PCA)、营养琼脂(NA)等培养基。

(2)嗜盐性弧菌建议使用含3%-3.5%氯化钠的胰蛋白胨大豆琼脂、3%-3.5%氯化钠的半固体等

(3)乳酸菌建议使用MRS琼脂

(4)真菌建议使用马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)、孟加拉红培养基等。

5、接种后的固体和液体培养基在菌株适宜的生长条件下培养。

注:1、分别接种固体和液体的目的是为了增加菌株活化的效率。

2、冻干菌株生长延迟期较长,需要连续活化两代才能使用。


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