瘦肉精”胶体金快速检测应注意的问题

 动物卫生监督所检验科  刘纪艳
    胶体金技术具有检测时间短，检测灵敏度高、操作简单、观察直观、经济可靠、不需特殊设备等特点，现已广泛用于有毒有害物质残留检测或疫病分析中检测抗原或抗体的存在。“瘦肉精”胶体金快速检测卡应用竞争抑制免疫层析的原理，样本中的“瘦肉精”在流动的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合，抑制了标记抗体和NC膜检测线上“瘦肉精”+蛋白偶联物的结合。胶体金的颗粒表面带较多电荷，能对蛋白质等高分子物质进行吸附结合，得到较多金蛋白，当这些标记物在固相载体上抗原抗体反应处聚集达到一定密度时（107个金颗粒/mm2），即出现肉眼可见的粉红色斑点。如果样本中“瘦肉精”含量大于检测限，检测线（T）不显颜色，结果为阳性。反之，检测线（T）显红色，结果为阴性。
    近年来，按照农业部文件精神、《畜牧条例》规定、市畜牧兽医局工作部署等，我市动物卫生监督机构以及生猪养殖场、生猪屠宰厂等常年大量使用“瘦肉精”胶体金检测卡进行“瘦肉精”残留监督检查及自查。为保障检测结果准确可靠，并有利于畜产品质量安全追溯工作开展，检测人员在使用“瘦肉精”胶体金检测卡过程中应注意以下问题：
    1、样品问题
    （1）尿液最好在宰前采集：生猪屠宰后可能会产生激素，对胶体金的稳定性产生破坏作用，宰后从膀胱取尿液检测容易出现假阳性，因此样品最好在宰前采集。
    （2）尿液离心处理：通常尿液样本可直接用来检测，但当尿液浑浊或有沉淀时必须经离心，取上清液进行相关实验，否则尿液中的杂质，随毛细作用上行，堵塞硝酸纤维膜上的微孔，导致金标记物不能上行，从而造成假阳性或试验无效。
    （3）组织样本：检测组织样本时，脂肪会导致假阳性结果，因此取样时应尽量弃去肉眼可见的脂肪部分。
    （4）样本保存：用干燥、洁净的离心管或适当容器采集50ml左右尿液或组织样本。如果不立即检测，样本在2-8℃冷藏可保存24小时，较长时间保存时需冷冻，避免反复冻融，避免腐败造成失效或污染。
    （5）样本复温：冷冻（藏）样品检测之前要恢复至室温。
    2、试验操作问题
    （1）样本编号及检测卡编号：除在采样过程中对样本进行规范编号外，要求检测前在检测卡上亦清晰规范地标记对应的样本编号（如猪尿编号格式：P/U年月日-XXX），以确保结果可靠，并有利于畜产品质量安全可追溯工作开展。
    （2）加样：须谨慎加样，避免产生气泡。
    （3）对照：试验中一定要做阴性对照，要用阴性样品作对照，不能用水或其他液体代替。
    （4）观察时间：在规定时间内观察C线及T线，时间过长会出现假阴性结果。
    3、检测环境控制问题
    操作环境温度最好在10℃~30℃之间，当实验操作环境温度过低时，会影响线条深浅；同时检测时避免阳光直射和风扇直吹，以避免可能出现假阳性的结果。
    4、检测卡的保存及使用问题
    检测卡需4-30℃ 干燥、避光储存，在有效期内使用。尽量不在冰箱冷藏保存；从铝箔袋中取出后，应尽快进行实验，避免试剂吸潮后失效。
    5、阳性样品处理问题
    出现阳性结果，应用检测卡复查并作阳性对照实验，仍然为阳性的按法定程序分瓶封装样品尽快送实验室进行定量确证检测。
    在“瘦肉精”胶体金快速检测过程中除要注意上述问题外，我们监督检测时，要按照《抽样程序》、《检验程序》等，及时做好抽样及检测工作记录，及时、准确、完整地填写《抽样单》和《现场检验原始记录》等，并由被检方负责人或见证人签字盖章确认。

评论加载中... 内容： 评论者： 验证码：